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C18液相色譜柱的使用及維護事項
點擊次數(shù):3235 發(fā)布時間:2022-07-07
C18液相色譜柱是一種常用的反相色譜柱, 它以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料,因此有較的碳含量和較好的疏水性,對各種類型的生物大分子有更的適應能力,適用范圍較廣。
C18液相色譜柱的使用注意事項及維護:
1.柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。
2.如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置1根柱,這樣有助于延長柱子的壽命。
3.如使用柱溫控制裝置時,應注意在通入流動相后才能升溫。
4.流動相使用前需進行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經(jīng)適當?shù)那疤幚砑斑^濾,以減少柱污染和堵塞。
5.在更換流動相種類時,應注意溶劑的互溶性,防止發(fā)生鹽析現(xiàn)象。
6.柱子的實際操作壓力應低于填裝時的*壓力,盡量在*壓力一半以下。
7.流動相的pH值應嚴格控制在2~7之間,以免損壞柱子。
8.在完成分離分析工作之后,不應立即停機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,一般0.5 h以上,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
9.如果流動相中有鹽類,首用水充分清洗。如果是胺類添加到流動相中,要用50%甲醇和0.05%磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。
10.選用合適的C18液相色譜柱,以保護分析柱免受雜質(zhì)顆粒及不可逆吸附的干擾物的影響。保護柱內(nèi)裝填料顆粒度應與分析柱填料的顆粒度盡量一致。